347 უჟანგავი ფოლადის ქიმიური შემადგენლობა ვენური ან კაპილარული სისხლის სიდიდე, სპეციფიკური SARS-CoV-2, T უჯრედების პასუხებისთვის, განსაზღვრავს იმუნიტეტს COVID-19-ის მიმართ.

გმადლობთ Nature.com-ის მონახულებისთვის.თქვენ იყენებთ ბრაუზერის ვერსიას შეზღუდული CSS მხარდაჭერით.საუკეთესო გამოცდილებისთვის, გირჩევთ გამოიყენოთ განახლებული ბრაუზერი (ან გამორთოთ თავსებადობის რეჟიმი Internet Explorer-ში).გარდა ამისა, მუდმივი მხარდაჭერის უზრუნველსაყოფად, ჩვენ ვაჩვენებთ საიტს სტილის და JavaScript-ის გარეშე.
სლაიდერები, რომლებიც აჩვენებს სამ სტატიას თითო სლაიდზე.გამოიყენეთ უკანა და შემდეგი ღილაკები სლაიდებში გადასაადგილებლად, ან სლაიდის კონტროლერის ღილაკები ბოლოს თითოეულ სლაიდში გადასაადგილებლად.

347 უჟანგავი ფოლადის ქიმიური შემადგენლობა

უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube ქიმიური შემადგენლობა

უჟანგავი ფოლადის 347 ხვეული მილის ქიმიური შემადგენლობა და მექანიკური თვისებები შემდეგია:
- ნახშირბადი – 0,030% მაქს
- ქრომი – 17-19%
- ნიკელი - 8-10,5%
- მანგანუმი - 1% მაქს

უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube მექანიკური თვისებები

უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube-ის მწარმოებლის მიხედვით, 347 Coil Tube-ის მექანიკური თვისებები:
- დაჭიმვის სიძლიერე (psi) – 75,000 წთ
- მოსავლიანობის სიძლიერე (psi) – 30000 წთ
- დრეკადობა (% 2″-ში) – 25% წთ
- ბრინელის სიმტკიცე (BHN) – 170 მაქს

უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube-ის გამოყენება და გამოყენება

• უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube გამოიყენება შაქრის Mills.
• უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube გამოიყენება სასუქი.
• უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube გამოიყენება ინდუსტრიაში.
• უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube გამოიყენება ელექტროსადგურებში.
• უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube გამოიყენება საკვებსა და რძის პროდუქტებში.
• უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube გამოიყენება ნავთობისა და გაზის ქარხანაში.
• უჟანგავი ფოლადის 347 Coil Tube მწარმოებელი, რომელიც გამოიყენება გემთმშენებლობის ინდუსტრიაში.

ითვლება, რომ SARS-CoV-2-სპეციფიკური T უჯრედები იცავს ინფექციას და COVID-19-ის პროგრესირებას, მაგრამ ამის პირდაპირი მტკიცებულება არ არსებობს.აქ ჩვენ შევადარეთ SARS-CoV-2-სპეციფიკური ინტერფერონ-γ დადებითი T უჯრედების მთლიანი სისხლის გაზომვები და დადებითი COVID-19 დიაგნოსტიკური ტესტის შედეგები (PCR და/ან გვერდითი ნაკადი) ლიანის სისხლის შეგროვებიდან 6 თვის განმავლობაში.148 მონაწილეს შორის, რომლებმაც შემოწირეს ვენური სისხლის ნიმუშები, SARS-CoV-2-სპეციფიკური T უჯრედების პასუხის სიდიდე მნიშვნელოვნად მაღალი იყო მათში, ვინც დაცულები დარჩნენ, ვიდრე ინფიცირებულებში (P <0.0001).ინფექციის პროცენტული რისკი, ხოლო მაღალი ინტენსივობით ეს რისკი 5.4%-მდე ამცირებს.ეს შედეგები განზოგადდა დამატებით 299 მონაწილეზე, რომლებმაც გამოსცადეს მასშტაბირებადი კაპილარული სისხლის ანალიზი, რომელსაც შეუძლია ხელი შეუწყოს პოპულაციის მასშტაბის T-უჯრედოვანი იმუნიტეტის მონაცემებზე წვდომას (14.9% v. 4.4%).ამრიგად, SARS-CoV-2-ისთვის სპეციფიკური T უჯრედების გაზომვას შეუძლია იწინასწარმეტყველოს ინფექციის რისკი და უნდა შეფასდეს ინდივიდუალური და მოსახლეობის იმუნური სტატუსის მონიტორინგის დროს.
SARS-CoV-2 ინფექციაზე იმუნური პასუხის გაზომვა და გაგება მნიშვნელოვანია მომავალი ეფექტური სტრატეგიების შესამუშავებლად, რათა მინიმუმამდე დაიყვანოთ საზოგადოებრივი ჯანმრთელობისა და ეკონომიკური ზემოქმედება მომავალი COVID-19 გავრცელების დროს.იმუნური კორელატების იდენტიფიცირება უზრუნველყოფს მნიშვნელოვან ინფორმაციას მოსახლეობის მგრძნობელობის შესახებ ვირუსული ინფექციის მიმართ, შესაძლოა ადრეული გაფრთხილება პიკის ჰოსპიტალიზაციის შესახებ და ასევე საშუალებას მისცემს ადამიანებს პირადად მართონ ინფექციის რისკი და სხვების დაინფიცირების რისკი.იმუნური ზედამხედველობა გადამწყვეტი აღმოჩნდა COVID-19 ვაქცინების ეფექტურობის შესაფასებლად ჯანმრთელ და მაღალი რისკის მქონე პაციენტებში1,2,3 განსაკუთრებით SARS-CoV-24 მუტანტებში და იმუნოდეფიციტის გამოვლენა ნიშნავს იმუნიტეტის გაძლიერების აუცილებლობას. მიიღეთ ვაქცინაცია და პრევენცია. მომავალი ეპიდემიები.
ინდივიდის იმუნიტეტის დონე SARS-CoV-2 ინფექციის მიმართ დამოკიდებულია მრავალ ფაქტორზე: ვირუსული დატვირთვა ექსპოზიციის დროს, ვირუსის ვარიანტები, ასაკი, წინა ვაქცინაციის/ინფექციის სტატუსი, თანმხლები დაავადებები, მედიკამენტები და რაც მთავარია, ანტი SARS-CoV ინფექცია. .2 ადაპტური იმუნური პასუხი ხდება ვირუსის ზემოქმედების დროს5.SARS-CoV-2 ინფექციაზე და/ან ვაქცინაციაზე იმუნური პასუხის შეფასება ფოკუსირებულია სეროლოგიურ ანალიზებზე, რომლებიც ზომავენ სტრუქტურული ცილისთვის სპეციფიკური ანტისხეულების არსებობას (მაგ., სპაიკის გლიკოპროტეინი).თუმცა, მხოლოდ ანტისხეულების არსებობა ან არარსებობა ზუსტად არ განსაზღვრავს დამცავ იმუნურ პასუხს, რადგან პასუხები მნიშვნელოვნად მცირდება დროთა განმავლობაში6 და SARS-CoV-2 ვარიანტების ნეიტრალიზაცია გამოჯანმრთელებულ ან ორმაგ ვაქცინირებულ პირებში სუსტი აქტივობა, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს დიდი გარღვევის ინფექციების რაოდენობა7.მართლაც, Omicron-ის ვარიანტით გამოწვეული სიმპტომატური COVID-19-ისგან დაცვა (B.1.1.529) შემცირდა დაახლოებით 10%-მდე mRNA ვაქცინაციის მხოლოდ 4-6 თვის შემდეგ, თუმცა მძიმე დაავადებისგან დაცვა გაგრძელდა >68% მინიმუმ 7 თვის განმავლობაში8.მეხსიერების ადაპტური T უჯრედების პასუხების გაზომვა, რომელიც უზრუნველყოფს ხანგრძლივ დაცვას ვირუსული ინფექციისგან, არის SARS-CoV-2 ინფექციისადმი მგრძნობელობის საუკეთესო მაჩვენებელი და, შესაბამისად, უკეთესი მაჩვენებელია COVID-199-ზე დადებითი ტესტირების რისკის შესახებ, ვინაიდან სპეციფიკური T უჯრედებს შეუძლიათ ინფექციის თავიდან აცილება.სეროკონვერსიის გარეშე10,11.თუმცა, T უჯრედების პასუხების გაზომვას ნაკლები ყურადღება ექცეოდა მეთოდოლოგიური სირთულეებისა და ვენური სისხლის ნიმუშების მიღებისა და ტრანსპორტირების ლოგისტიკური პრობლემების გამო, განსაკუთრებით დიდი დაკვირვების კვლევების ჩატარებისას ვაქცინის ეფექტურობის შესაფასებლად და იმუნიტეტის მონიტორინგისთვის.თუმცა, ვაქცინირებული პირები აჩვენებენ ძლიერ T უჯრედების აქტივობას SARS-CoV-2 ვარიანტების წინააღმდეგ, რაც პოტენციურად ანაზღაურებს ანტისხეულების რეაქტიულობის დაკარგვას COVID-1912,13-ის სიმძიმის შეზღუდვის მიზნით.
აქ ჩვენ ვცდილობდით გაგვერკვია, შეიძლებოდა თუ არა SARS-CoV-2 T უჯრედების პასუხის ერთჯერადი გაზომვა სისხლის აღებიდან 6 თვის განმავლობაში SARS-CoV-2 ინფექციის აბსოლუტური რისკის პროგნოზირება, მიუხედავად იმუნური გავლენის წინა ფაქტორებისა.იმისათვის, რომ T უჯრედების ტესტი მაღალი გამტარუნარიანობა ყოფილიყო და უფრო ფართო კვლევებისთვის გამოსაყენებელი ყოფილიყო, ჩვენ ასევე ვცდილობდით ტესტის მინიატურული გაგვეკეთებინა ისე, რომ მისი ჩატარება შესაძლებელი იყო კაპილარული თითის ღეროვანი სისხლის ნიმუშის გამოყენებით.
ჩვენ გავზომეთ უჯრედული და ჰუმორული იმუნური პასუხები ჯანმრთელ დონორებში SARS-CoV-2 T უჯრედების და IgG ანტისხეულების კომბინირებული გამოვლენის გამოყენებით მთლიან ვენურ სისხლზე (მონაწილის მახასიათებლებისთვის იხილეთ 2022 წლის მარტი 14. ვაქცინირებულ დონორებში SARS-CoV-2- სპეციფიკური T-უჯრედული პასუხები განისაზღვრა პლაზმური ინტერფერონ-γ (IFN-γ) დონის გაზომვით SARS-CoV-2 პეპტიდით მთლიანი სისხლის სტიმულაციის შემდეგ (როგორც ადრე, იხ. 14,15,16,17,18) და დაკავშირებული IgG პასუხებით. ნუკლეოკაფსიდით (N) გაიზარდა მათში, ვინც აღნიშნა წინა ინფექციაზე, თუმცა ორივე პასუხი უფრო მაღალი იყო ადრე ინფიცირებულ არავაქცინირებულ დონორებში, მაქსიმალური სხეულში (ნახ. 1a,b). ყველაზე მაღალი იყო ადრე ინფიცირებულ ვაქცინირებულ დონორებში (სურათი 1c–e).
SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ+ T უჯრედების პასუხები გაზომილი იყო ვენური მთლიანი სისხლის ანალიზით და ეფუძნება მონაწილეთა ვაქცინაციას და SARS-CoV-2 ინფექციის წინა სტატუსს (დადასტურებული PCR და/ან გვერდითი ნაკადის ტესტით)' Vac + /Inf +' n = 60 (მწვანე), 'Vac + /Inf-' n = 82 (ლურჯი), 'Vac-/Inf +' n = 4 (ყვითელი), 'Vac-/Inf-' n = 1 (არ გამოიყენება).SARS-CoV-2-სპეციფიკური IgG-ის დამაკავშირებელი რეაქციები მიზნად ისახავს ნუკლეოკაფსიდს ("N") (b; ****P <0.0001, **P = 0.0016), წვეტიანი რეცეპტორების დამაკავშირებელი დომენი ("RBD") (c; ** P = 0,0022, *P < 0,015), სპიკის ქვედანაყოფი 1 („S1“) (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac- /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0.012) და პიკური ქვეგანყოფილება 2 („S2“) (e) გაზომილი იყო ვენური მთლიანი სისხლის ტესტებით და ეფუძნება მონაწილის ვაქცინაციას და წინა SARS -CoV-2 (დადასტურებული PCR და/ ან გვერდითი ნაკადის ტესტი) ინფექციური სტატუსი.'Vac + /Inf +' n = 60 (მწვანე), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (ლურჯი), 'Vac-/Inf +' n = 4 (ყვითელი).შედარება განხორციელდა კრუსკალ-უოლისის ტესტის გამოყენებით, მორგებული მრავალჯერადი შედარებისთვის დანის ტესტის გამოყენებით.მონაცემები ნაჩვენებია სქემების სახით (ცენტრალური ხაზი მედიანაზე, ზედა ზღვარი 75-ე პროცენტული, ქვედა ზღვარი 25-ე პროცენტული) ულვაშებით მინიმალური და მაქსიმალური მნიშვნელობებით.თითოეული წერტილი წარმოადგენს დონორს.ნედლეული მონაცემები მოწოდებულია ნედლეული მონაცემთა ფაილების სახით.
სისხლის აღების შემდეგ, მონაწილეებს სთხოვეს თვითმმართველობის მოხსენება დადებითი PCR და/ან გვერდითი ნაკადის ტესტის შედეგების შესახებ COVID-19-ზე;თუ მონაწილეებმა დადებითი ტესტირება გამოავლინეს 2021 წლის 1 სექტემბრიდან 2021 წლის 29 დეკემბრამდე, ისინი დაინფიცირებულნი იყვნენ დელტა (B.1.617.2) ვარიანტის კოროვირუსით და Omicron (B.1.1.529) საზოგადოებრივი ჯანდაცვის უელსში 2021 წლის 29 დეკემბრის შემდეგ, როდესაც შეშფოთების ეს ვარიანტი დომინანტური ხდება.148 შესაფასებელ დონორს შორის, ჩვენ დავაფიქსირეთ ინფექციის მაჩვენებელი 26.3% (39/148) სისხლის დონაციის 6 თვის განმავლობაში, რომელთაგან 38-მა მიიღო COVID-19 ვაქცინის მეორე ან მესამე დოზა (ინფექციის გარღვევა მოხდა Pfizer/BioNTech-ის შემდეგ ( BNT162b2) mRNA ვაქცინა ან AstraZeneca ვაქცინა (ChAdOx1 nCoV-19));ასევე დაინფიცირდა არავაქცინირებული დონორი.SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ-დადებითი T უჯრედების პასუხების სიდიდე მნიშვნელოვნად დაბალი იყო მათში, ვინც აცნობეს დადებით სადიაგნოსტიკო ტესტს COVID-19-ზე, ვიდრე არაინფიცირებულ დონორებში (P <0.0001; სურ. 2a), ძირითადად იმის გამო T უჯრედების პასუხების ოპტიმალური ინდუქცია ვაქცინაციით ზოგიერთ მონაწილეში (P = 0.050; დამატებითი ნახ. 1).არ არსებობდა კორელაცია IFN-γ+ T უჯრედების პასუხის სიდიდესა და COVID-19 ტესტის დადებითი შედეგის დროს (დამატებითი სურათი 2).ამის საპირისპიროდ, არც RBD-, S1-, S2-შემაკავშირებელი IgG პასუხები (სურათები 2b–d) და არც RBD-, S1-მანეიტრალებელი ანტისხეულების პასუხები არ იყო სპეციფიკური ველური ტიპის ან დელტა SARS-CoV-2-სთვის (B.1.617).) (დამატებითი სურ. 3) შეუძლია განასხვავოს ინფექციის რისკის ქვეშ მყოფი ადამიანები.თუმცა, დაბალი N-დაკავშირებული IgG პასუხები SARS-CoV-2-ის მიმართ კორელაციაშია COVID-19 ინფექციის რისკთან (P = 0.0084; სურათი 2e);ვინც დადებითად გამოსცადა, იყო 85%-ით ნაკლები ალბათობა (P = 0.00035; OR 0.15, 95).% CI: 0.047–0.39 (დამატებითი სურათი 4).
ჯანმრთელი დონორების ვენური სისხლის ნიმუშები (n = 148) შეფასდა SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ+ T-უჯრედების პასუხები (a; ****P <0.0001) და Spike რეცეპტორის შეკავშირება სპეციფიკურ SARS-CoV-თან -2 სტიმული.დომენი („RBD“) (b), სპაიკი 1 ქვეერთეული („S1″) (c), სპაიკი 2 ქვეგანყოფილება („S2″) (d) და ნუკლეოკაფსიდი („N“) (e; **P = 0.0084 ) .გამოვლენილი მონაწილეები, რომლებმაც დადებითი ტესტირება გამოავლინეს COVID-19-ზე (PCR და/ან გვერდითი ნაკადი);ყველა ინფექცია მოხდა სისხლის აღებიდან 6 თვის განმავლობაში.შედარება განხორციელდა ორკუდიანი Mann-Whitney ტესტის გამოყენებით.მონაცემები ნაჩვენებია სქემების სახით (ცენტრალური ხაზი მედიანაზე, ზედა ზღვარი 75-ე პროცენტული, ქვედა ზღვარი 25-ე პროცენტული) ულვაშებით მინიმალური და მაქსიმალური მნიშვნელობებით.თითოეული წერტილი წარმოადგენს დონორს.ns არ არის მნიშვნელოვანი.სითბოს რუკა f აჩვენებს Spearman-ის რანგის კორელაციას ცვლადებს შორის მითითებული მონაცემთა ნაკრებისთვის.შედარება, რომელიც არ იყო სტატისტიკურად მნიშვნელოვანი, გამოირიცხა მატრიციდან და მონიშნული იყო ცარიელი უჯრედებით.ნედლეული მონაცემები მოწოდებულია ნედლეული მონაცემთა ფაილების სახით.
წინასწარ დაყენებული დიაგნოსტიკური პოზიტიური ზღვრული 14 მიჩნეული იყო ზედმეტად თვითნებურად ხელახალი ინფექციის რისკის შესაფასებლად, ამიტომ დადგინდა ინტერკვარტული დიაპაზონები აბსოლუტური რისკის პარამეტრების დასადგენად.სტატისტიკურმა მოდელმა, რომელიც მოიცავდა მხოლოდ ცვლადებს, რომლებიც მნიშვნელოვან გავლენას ახდენდნენ შედეგებზე, აჩვენა, რომ SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ+ T უჯრედების პასუხის სიდიდე იყო ყველაზე მნიშვნელოვანი იმუნური ბიომარკერი ინდივიდის ყოფნის შანსების დასადგენად. ტესტირება COVID-ზე.-19 დადებითი (სურათი 2f და დამატებითი სურათი 4).პაციენტები SARS-CoV-2 სპეციფიკური IFN-γ+ T უჯრედების პასუხით მესამე (194-489 pg/ml IFN-γ) და მეოთხე (>489 pg/ml IFN-γ) კვარტლებში 65% (P = 0.055; OR 0.35, 95% CI: 0.11–1.00) და 90% (P = 0.0050; OR 0.098, 95% CI: 0.014–0.42) მეტი მონაწილე ჰყავდა.შანსი მცირეა (დამატებითი სურ. 4).საერთო ჯამში, მონაწილეებს, რომლებსაც აქვთ SARS-CoV-2 სპეციფიკური T უჯრედების პასუხი ვენური სისხლიდან ≤79 pg/mL IFN-γ ჰქონდათ გარღვევის რისკი 43.2% 6 თვეში, ვიდრე პასუხი >489 pg/mL.მლ IFN-γ-ს ჰქონდა ინფექციის რისკი 5.4% (ცხრილი 2).
ვენური მთლიანი სისხლის ტესტირება შეზღუდულია ფლებოტომისტის მიერ ნიმუშის შეგროვების საჭიროების გამო.SARS-CoV-2-ისთვის T უჯრედების და IgG ტესტირების ხელმისაწვდომობის გასაზრდელად, შემუშავებულია კაპილარული სისხლის სინჯის აღების ალტერნატიული მეთოდი, რომელიც მონაწილეებს საშუალებას აძლევს მიიღონ თითის ღეროვანი სისხლის ნიმუშები სახლში.ჩვენი ცოდნით, არ ყოფილა წინა ანგარიშები ანტიგენ-სპეციფიკური T უჯრედების ფუნქციის გაზომვის შესახებ კაპილარული სისხლის ნიმუშებში.ადრე ნაჩვენები იყო ძლიერი კორელაცია ლიმფოციტების რაოდენობას შორის, რომლებიც მიღებულ იქნა შედარებით კაპილარული და ვენური სისხლის ნიმუშების გამოყენებით.გარდა ამისა, ცნობილია, რომ მთლიან სისხლზე დაფუძნებული ანალიზები SARS-CoV-2-ს სპეციფიკური T უჯრედების პასუხების გასაზომად იყენებენ მხოლოდ 320 μL ვენურ სისხლს,20 რაც გამორიცხავს შეშფოთებას კაპილარული სისხლის ნიმუშებში პროგენიტორული T უჯრედების სიხშირის შესახებ.
ჩვენ გამოვიყენეთ SARS-CoV-2 T უჯრედების და IgG ანტისხეულების ეს მაღალი გამტარუნარიანობის სტანდარტიზებული ერთობლივი ანალიზი, რომელიც დაფუძნებულია კაპილარულ მთლიან სისხლზე, უჯრედული და ჰუმორული იმუნური პასუხის გასაზომად მონაწილეებში სხვადასხვა თანმხლები დაავადებებით და წინა ვაქცინაციის/ინფექციის სტატუსით (ცხრილი 1).მიღებული იქნა დიდი ბრიტანეთიდან 2022 წლის 24 იანვრიდან 14 მარტამდე14. თითის ნიმუშების უმრავლესობა (90.9%) სწორად იქნა მიღებული და გაიგზავნა ლაბორატორიაში შეგროვებიდან 24 საათის განმავლობაში.ზოგიერთ შემთხვევაში, ნიმუშები მიღებულ იქნა სისხლის აღებიდან 48 საათის განმავლობაში, მაგრამ არცერთმა ნიმუშმა არ გაიარა ხარისხის კონტროლის შემოწმება და არ იმოქმედა საერთო T უჯრედების ან ანტისხეულების გაზომვებზე (დამატებითი სურათი 5).მიუხედავად იმისა, რომ არსებობდა განსხვავებები SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ+ T უჯრედების პასუხის სიდიდეში, რომელიც გაზომილია შესაბამის კაპილარულ და ვენურ სისხლის ნიმუშებში ზოგიერთ ინდივიდში, არ იყო მნიშვნელოვანი განსხვავებები მთლიანობაში (P = 0.88; დამატებითი სურ. 6. ).).
SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ+ T უჯრედების პასუხები მნიშვნელოვნად გაიზარდა ვაქცინირებულ პირებში, რომლებმაც ასევე აღნიშნეს წინა ინფექცია (P = 0.0001), მაგრამ არა მნიშვნელოვნად მაღალი ვიდრე ადრე ინფიცირებულ არავაქცინირებულ დონორებში (P = 0.19, ნახ. 3a).).IgG პასუხები სპაიკ გლიკოპროტეინის მიმართ (RBD, S1, S2) მნიშვნელოვნად მაღალი იყო ვაქცინირებულ დონორებში, ვიდრე არავაქცინირებულ დონორებში, განურჩევლად წინასწარი ინფექციის სტატუსისა (სურათი 3b-d).საინტერესოა, რომ საშუალო N-შეკრული IgG პასუხი იყო ყველაზე მაღალი ადრე ინფიცირებულ არავაქცინირებულ მონაწილეებში ვაქცინირებულ მონაწილეებთან შედარებით, თუმცა ამან ვერ მიაღწია მნიშვნელობას (სურათი 3e).არავაქცინირებულ და არაინფიცირებულ დონორებს შორის, რომლებმაც განაცხადეს, 37 მონაწილედან 15 (40.5%) დადებითი იყო N-დაკავშირებულ IgG-ზე, ადრე დადგენილ ზღურბლზე 2.0 BAU/mL14;ეს 15 მონაწილე ამ პაციენტებიდან თორმეტმა დადებითად გამოსცა IFN-γ+ T უჯრედების პასუხი 22.7 pg/mL IFN-γ14 ადრე დადგენილ ზღურბლზე ზემოთ.ამიტომ, სავარაუდოა, რომ ეს მონაწილეები ადრე იყვნენ ინფიცირებული SARS-CoV-2-ით და არ ჩაუტარებიათ ტესტირება COVID-19-ზე პირადი არჩევანის, PCR და/ან გვერდითი ნაკადის აღჭურვილობის არარსებობის გამო, ან იყვნენ ასიმპტომური.მიუხედავად იმისა, რომ არსებობდა მნიშვნელოვანი კორელაცია T უჯრედების პასუხებს შორის IFN-γ+ და N-დაკავშირებულ IgG დონეებზე არავაქცინირებულ დონორებში (P = 0.0044; დამატებითი სურათი, N-დაკავშირებული IgG პასუხი უფრო სწრაფად მცირდებოდა, ვიდრე N-დაკავშირებული IgG პასუხი, ხოლო IFN-γ. + T უჯრედების პასუხები შენარჩუნებული იყო ვაქცინაციის სტატუსის მიუხედავად, თუმცა დონორთა რაოდენობა გამოწვევის შემდგომ 50 კვირაში დაბალი იყო (დამატებითი სურ. 8). ვაქცინაციის ტიპი ზოგადად მცირედ განსხვავდებოდა SARS-CoV-2, T სპეციფიკურ IgG პასუხებში. უჯრედები და RBD ასოცირებული, თუმცა მონაწილეებმა, რომლებმაც მიიღეს BNT162b2-ის ორი დოზა, რასაც მოჰყვა mRNA1273 რევაქცინაცია, აჩვენეს IFN-γ + T უჯრედების მნიშვნელოვნად მაღალი დონეები უფრო მგრძნობიარენი იყვნენ SARS-CoV-2-ის მიმართ, ვიდრე ისინი, ვინც იღებდნენ ChAdOx1 და BNT162b2-ის ორ დოზას (დამატებითი სურ. 9) გარდა ამისა, მოხსენებულ თანმხლებ დაავადებებს ჰქონდა მცირე საერთო განსხვავება დაკვირვებულ T უჯრედების პასუხებში ჯანმრთელ დონორებთან შედარებით (დამატებითი სურ. 10).
SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ+ T უჯრედების პასუხები გაზომილი იყო მთლიანი სისხლის კაპილარული ანალიზით და ეფუძნებოდა მონაწილეთა ვაქცინაციას და წინა SARS-CoV-2 ინფექციურ სტატუსს (დადასტურებული PCR და/ან გვერდითი ნაკადის ტესტით).'Vac + /Inf +' n = 42 (მწვანე), 'Vac + /Inf-' n = 158 (ლურჯი), 'Vac-/Inf +' n = 33 (ყვითელი), 'Vac- /Inf-' n = 37 (ნაცრისფერი).****P <0.0001, ***P = 0.0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0.045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac- /Inf-) P = 0.014 .SARS-CoV-2 სპეციფიური IgG-ის დამაკავშირებელი რეაქციები სპაიკის რეცეპტორების დამაკავშირებელ დომენზე („RBD“) (b; ****P <0.0001, ns: არამნიშვნელოვანი), მწვერვალის ქვედანაყოფი 1 („S1“) (c; * * **P <0,0001, ns: არ არის მნიშვნელოვანი), მწვერვალის ქვედანაყოფი 2 („S2″) (d; ****P <0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016 ) და ნუკლეოკაფსიდი („N“) (ე; ****P <0.0001, ns არა მნიშვნელოვანი) გაზომილი იყო ვენური მთლიანი სისხლის ანალიზის გამოყენებით და ეფუძნება მონაწილეთა ვაქცინაციას და წინა SARS-CoV-2 (დადასტურებული PCR და/ან გვერდითი ნაკადის ანალიზით) ინფექციები იყოფა სტატუსი.'Vac + /Inf +' n = 46 (მწვანე), 'Vac + /Inf-' n = 182 (ლურჯი), 'Vac-/Inf +' n = 34 (ყვითელი), 'Vac-/Inf-' n = 37 (ნაცრისფერი).შედარება განხორციელდა კრუსკალ-უოლისის ტესტის გამოყენებით, მორგებული მრავალჯერადი შედარებისთვის დანის ტესტის გამოყენებით.მონაცემები ნაჩვენებია სქემების სახით (ცენტრალური ხაზი მედიანაზე, ზედა ზღვარი 75-ე პროცენტული, ქვედა ზღვარი 25-ე პროცენტული) ულვაშებით მინიმალური და მაქსიმალური მნიშვნელობებით.თითოეული წერტილი წარმოადგენს დონორს.ნედლეული მონაცემები მოწოდებულია ნედლეული მონაცემთა ფაილების სახით.
როგორც ადრე, მონაწილეებს სთხოვეს შეატყობინონ დადებითი PCR და/ან გვერდითი სისხლის ნაკადის შედეგები COVID-19-ისთვის;გაერთიანებული სამეფოს ჯანდაცვის სააგენტოს ცნობით, მონაწილეები ვარაუდობდნენ, რომ დაინფიცირებულნი იყვნენ Omicron კორონავირუსით (B.1.1.529) დადებითი ვირუსის ვარიანტის ტესტირების დროს, რადგან ის იყო დომინანტური ვარიანტი დიდ ბრიტანეთში კვლევის პერიოდში.299 შესაფასებელ დონორს შორის, ჩვენ დავაფიქსირეთ ინფექციის მაჩვენებელი 8.0% (24/299) კაპილარული დონაციის სამი თვის განმავლობაში, რომელთაგან შვიდი არ იყო ვაქცინირებული.ყველა მონაწილეს შორის თანმხლები დაავადებების წილი უფრო დაბალი იყო მათში, ვინც დადებითად გამოსცა COVID-19 (10.7%), ვიდრე მათ, ვინც ტესტირება უარყოფითი იყო COVID-19-ზე (24.4%, ცხრილი 1), რაც შეიძლება გამოწვეული იყოს იმით, რომ მონაწილეები გარკვეული დაავადებები უფრო ფრთხილად და იცავს პოტენციურ შედეგებს, როგორიცაა დიაბეტი და კიბო.როგორც დაფიქსირდა ვენური სისხლის კოჰორტაში, SARS-CoV-2-სპეციფიკური ინტერფერონ-γ (IFN-γ)-დადებითი T უჯრედები გაზომილი იყო კაპილარული სისხლის ნიმუშებში იმ პირებისგან, რომლებიც აფიქსირებდნენ დადებით დიაგნოსტიკურ ტესტს COVID-19-ზე.პასუხის სიდიდე მნიშვნელოვნად დაბალი იყო, ვიდრე არაინფიცირებულ დონორებში (P = 0.034; სურათი 4a) ვაქცინაციით და/ან წინასწარი ინფექციით T უჯრედების პასუხის შედარებით ცუდი ინდუქციის გამო (დამატებითი სურათი 11).ანალოგიურად, არც RBD-, S1-, S2-შემაკავშირებელი IgG პასუხები (სურათები 4b–d) და არც RBD-, S1-მანეიტრალებელი ანტისხეულების პასუხები არ იყო სპეციფიკური ველური ტიპის ან დელტა SARS-CoV-2-სთვის (B. 1.617).(დამატებითი სურათი 12).შესაძლებელია ინფექციის ნებისმიერი მნიშვნელოვანი რისკის მქონე პირების იდენტიფიცირება.ვენური კოჰორტისგან განსხვავებით, N-თან დაკავშირებული IgG პასუხები ასევე არ განასხვავებს COVID-19 რისკს (სურათი 4e), რაც ვარაუდობს, რომ Omicron-ის ვარიანტი (B.1.1.529) ზრდის იმუნურ თავის არიდებას ადრე ინფიცირებულ პირებში, როგორც ახლახან აღწერილია 21. ამის საპირისპიროდ, SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ T უჯრედების პასუხის სიძლიერე კვლავ იყო ყველაზე მნიშვნელოვანი ცვლადი COVID-19-ზე დადებითი ტესტირების ინდივიდუალური შანსების განსაზღვრაში (სურათი 4f).საერთო ჯამში, SARS-CoV-2-ს სპეციფიკური კაპილარული T-უჯრედების პასუხის მქონე მონაწილეებს ≤23,7 პგ/მლ IFN-γ ჰქონდათ ინფექციის 14,9% რისკი სამ თვეში, ვიდრე პასუხი >141,6 პგ/მლ.მლ IFN.-γ-ს ჰქონდა ინფექციის რისკი 4.4% (ცხრილი 2).
IFN-γ+ T უჯრედების პასუხები, რომლებიც სპეციფიკურია SARS-CoV-2-ისთვის (a; *P = 0.034) და SARS-CoV-2-ის სპეციფიკური IgG-ზე მიზნობრივი რეცეპტორების დამაკავშირებელი დომენისთვის („RBD“) (b), სპიკის ქვედანაყოფი 1 (' S1') (c), სპიკის ქვედანაყოფი 2 ('S2') (დ) და ნუკლეოკაპსიდის შებოჭვის რეაქცია ('N') (e).მონაწილეები იდენტიფიცირებულნი იყვნენ დადებითად COVID-19 ტესტებზე (PCR და/ან გვერდითი სისხლის ნაკადის ტესტი), ყველა ინფექცია მოხდა სისხლის აღებიდან 3 თვის განმავლობაში.შედარება განხორციელდა ორკუდიანი Mann-Whitney ტესტის გამოყენებით.მონაცემები ნაჩვენებია სქემების სახით (ცენტრალური ხაზი მედიანაზე, ზედა ზღვარი 75-ე პროცენტული, ქვედა ზღვარი 25-ე პროცენტული) ულვაშებით მინიმალური და მაქსიმალური მნიშვნელობებით.თითოეული წერტილი წარმოადგენს დონორს.ns არ არის მნიშვნელოვანი.სითბოს რუკა f აჩვენებს Spearman-ის რანგის კორელაციას ცვლადებს შორის მითითებული მონაცემთა ნაკრებისთვის.შედარება, რომელიც არ იყო სტატისტიკურად მნიშვნელოვანი, გამოირიცხა მატრიციდან და მონიშნული იყო ცარიელი უჯრედებით.ნედლეული მონაცემები მოწოდებულია ნედლეული მონაცემთა ფაილების სახით.
როგორც ჩვენ გადავდივართ COVID-19 პანდემიის შემდეგ ეტაპზე, აქცენტი პრევენციიდან გადაინაცვლებს რისკის ინდივიდუალურ მართვასა და საზოგადოების დაუცველი წევრების იდენტიფიცირებაზე.COVID-19-ის მიმართ იმუნიტეტის კორელატების ჩამოყალიბება გადამწყვეტია ამ მაღალი რისკის ჯგუფების ეფექტური იდენტიფიკაციისა და მკურნალობისთვის.ახლა იზრდება მტკიცებულება, რომ T-უჯრედების იმუნიტეტი იცავს SARS-CoV-2 ინფექციისგან და ზღუდავს COVID-1910-ის სიმძიმეს.აქ წარმოდგენილი მონაცემები აჩვენებს, რომ SARS-CoV-2-სპეციფიკური IFN-γ+ T უჯრედების პასუხების კომბინირებული სიძლიერე მწვერვალების, მემბრანის და ნუკლეოკაპსიდის სტრუქტურული ცილების წინააღმდეგ უფრო მეტ დაცვას უზრუნველყოფს COVID-19-ისგან, ვიდრე ანტისხეულების შეკავშირებას.19 ხელს უწყობს ან ანეიტრალებს პასუხებს. .და მხედველობაში უნდა იქნას მიღებული ინდივიდუალური და/ან ნახირის იმუნიტეტის შეფასებისას.რნმ-ის ვირუსები, როგორიცაა SARS-CoV-2 ან გრიპის A ვირუსი (IAV) თავიდან აიცილებენ სეროლოგიურ ნეიტრალიზაციას ანტისხეულების მიერ აღიარებულ ზედაპირულ ანტიგენებზე სწრაფად განვითარებული B-უჯრედების ეპიტოპებით.T უჯრედების მიერ მოწოდებული დამცავი იმუნური პასუხი შეიძლება ასახავდეს ეპიტოპების დამიზნებას ვირუსული ცილების უფრო კონსერვირებული რეგიონებიდან, რომლებიც სწრაფად ვერ აცილებენ იმუნურ პასუხს.T უჯრედების შუამავლობით დაცვა ახალი SARS-CoV-2 ვარიანტებისგან მსგავსია ჰეტეროსუბტიპური დაცვისა, რომელსაც შუამავლობს კონსერვირებული შინაგანი ცილების T უჯრედების დამიზნებით, რომელიც ჩანს IAV22,23 ქვეტიპებში.
მიუხედავად COVID-19-ზე ფიჭური იმუნური პასუხის გაზომვის უზარმაზარი პოტენციალისა, შედარებით მცირე ყურადღება დაეთმო ზუსტი, მაღალი გამტარუნარიანობის, სტანდარტიზებული T-უჯრედების ანალიზის შემუშავებას.T უჯრედების პასუხების გაზომვასთან დაკავშირებული ტრადიციული სირთულეები და ხარჯები გამორიცხავს T უჯრედების იმუნიტეტის ზუსტ განსაზღვრას დიდი პოპულაციის იმუნიტეტის სკრინინგის დროს.მიუხედავად იმისა, რომ ცოტა ხნის წინ ხელმისაწვდომი გახდა მთელი სისხლის პეპტიდების სტიმულაციის რამდენიმე კომერციული ანალიზი, ამჟამად ყველას სჭირდება ფლებოტომისტი სისხლის მისაღებად, რაც ზღუდავს ხელმისაწვდომობას და მასშტაბებს.კაპილარული სისხლის სისტემები ფართოდ გამოიყენება პოპულაციაში SARS-CoV-2 ანტისხეულების გავრცელების დასადგენად.ჩვენ ადაპტირებულია კაპილარული სისხლის ანალიზები მთლიანი სისხლის პეპტიდის სტიმულაციის ანალიზების შესასრულებლად T უჯრედების რეაქტიულობის შესაფასებლად SARS-CoV-2 სტრუქტურულ ცილებზე და SARS-CoV-2 სპეციფიურ ანტისხეულებზე პასუხებზე.სინამდვილეში, SARS-CoV-2-სპეციფიკური ანტისხეულების და T უჯრედების კომბინირებული გაზომვა იმავე კაპილარული სისხლის ნიმუშში ძალიან მიმზიდველია: (i) ამცირებს სისხლის მრავალჯერადი ანალიზის საჭიროებას თითოეულ მონაწილეზე, (ii) აუმჯობესებს მონაწილეთა გამოცდილებას და გაგებას;(iii) გააუმჯობესოს ლოჯისტიკა და შეამციროს დუბლირება, (iv) შეამციროს გარემოზე ზემოქმედება, რადგან საჭიროა ნაკლები ლაბორატორიული სახარჯო მასალები და ნიმუშის მიწოდება.მიუხედავად იმისა, რომ საერთო IFN-γ რეაქტიულობა იყო მსგავსი ვენური და კაპილარული სისხლის ნიმუშებს შორის, დაფიქსირდა, რომ ის უფრო დაბალი იყო მონაწილეთა კაპილარული სისხლის კოჰორტაში (ნახ. 4a) ვენურ სისხლის კოჰორტასთან შედარებით (ნახ. 2a).IFN-γ მნიშვნელობები ამ აღმოჩენას რამდენიმე ახსნა აქვს, კერძოდ, მონაწილეთა დიდი რაოდენობა თანმხლები დაავადებებით, რომლებიც საჭიროებენ იმუნოსუპრესიულ თერაპიას, იყო რეკრუტირებული კაპილარული სისხლის აღების კოჰორტაში (ცხრილი 1) და სისხლძარღვებიდან მიღებული T უჯრედების სიცოცხლისუნარიანობა და/ან ფუნქცია. ნიმუშები შეიძლება იყოს დაბალი, განსაკუთრებით პეპტიდის სტიმულაციამდე ნიმუშების გრძელვადიანი შენახვის პირობების გათვალისწინებით.
ამჟამად ფართოდ ხელმისაწვდომი COVID-19 ვაქცინა უზრუნველყოფს საუკეთესო დაცვას მძიმე დაავადებისგან მიმღებთა უმეტესობისთვის ვაქცინაციიდან 6 თვის განმავლობაში8.გამამხნევებელია, მიუხედავად ვაქცინით გამოწვეული SARS-CoV-26,7 ვარიანტების ცუდი სეროლოგიური ნეიტრალიზაციისა, ველური ტიპის SARS-CoV-2 ვაქცინაციით გამოწვეული T-უჯრედების პასუხები რჩებოდა უაღრესად რეაქტიული, რადგან გაჩნდა 25 სხვა.აქ წარმოდგენილი მონაცემები ადასტურებს ვაქცინის იმუნოგენურობის უფრო ფართო შეფასების მნიშვნელობას, ხაზს უსვამს ვაქცინებს არასაკმარისი T-უჯრედების იმუნიტეტის მქონე უეცარი ინფექციისა და ვირუსის მუდმივი გადაცემის თავიდან ასაცილებლად.ჩვენ ასევე დავაკვირდით, რომ ბევრ არავაქცინირებულ ინდივიდს, რომლებიც გადაყვანილ იქნა კაპილარულ კოჰორტაში, ჰქონდა SARS-CoV-2-სპეციფიკური T უჯრედების (და N-დამკავშირებელი IgG) მნიშვნელოვანი პასუხი წინა ვაქცინაციის მიუხედავად, რაც, სავარაუდოდ, წინა ინფექციით არის განპირობებული.შესაბამისი პირების ვაქცინაციის ნაცვლად, მათი ინფექციის რისკი უნდა შეფასდეს მათი ამჟამინდელი იმუნიზაციის სტატუსისა და გაკეთებულ ინფორმირებულ არჩევანზე დაყრდნობით.
ამ კვლევის შეზღუდვები მოიცავს გარანტიას, რომ მონაწილეებმა თავად განაცხადეს SARS-CoV-2 ინფექცია სისხლის შეგროვების შემდეგ, რათა დადგინდეს იმუნიტეტის შესაბამისობა;ზოგიერთ მონაწილეს შეიძლება ჰქონდეს უსიმპტომო ინფექცია და ვერ გაიაროს PCR და/ან გვერდითი ნაკადის ტესტირება COVID-19-ზე.ჩვენს მონაცემთა ბაზას ასევე აკლია ინფორმაცია მონაწილეთა მედიკამენტების შესახებ სისხლის აღების დროს.გარდა ამისა, იმის გათვალისწინებით, რომ ჩვენმა ყველა მონაწილემ აღნიშნა მხოლოდ მსუბუქი/ზომიერი სიმპტომები ან სიმპტომების გარეშე, შეუძლებელი იყო იმუნური პასუხების იდენტიფიცირება ჩვენი მონაცემთა ნაკრებიდან, რომელიც იწინასწარმეტყველებდა მძიმე ავადმყოფობისა და ჰოსპიტალიზაციის რისკს COVID-19-ისთვის.თუმცა, CD8+ T უჯრედების პასუხების არსებობა ნუკლეოკაპსიდისთვის სპეციფიური ეპიტოპების წინააღმდეგ ბოლო დროს დაკავშირებულია დაცვასთან მძიმე COVID-1926-ისგან.გარდა ამისა, აქ გამოყენებული ანალიზმა არ გაზომა T უჯრედების პასუხები სპეციფიკურ ადრეულ გამოხატულ SARS-CoV-2 არასტრუქტურულ პროტეინებზე, რომლებიც ახლახან დადასტურდა, რომ უპირატესად გროვდება სერონეგატიურ ჯანდაცვის მუშაკებში, რომლებიც კონტაქტში იყვნენ ინფიცირებულ პაციენტებთან.ამ ნაშრომზე დაყრდნობით, რეკრუტირების დროს საზოგადოებაში გადაცემის გავრცელების და პოპულაციაში კონტაქტური ინფექციის მაღალი ალბათობის გათვალისწინებით, ჩვენს ტესტებში ნაპოვნი SARS-CoV-2 სპეციფიკური T უჯრედების რაოდენობას ასევე შეუძლია კლირენსი.სუბკლინიკური ინფექციები ჩვენს კოჰორტებში.დაბოლოს, ჩვენ არ გავზომეთ ინტერლეუკინ 2-ის გამომუშავება T უჯრედების მიერ, რადგან ჩვენმა წინა ნაშრომმა აჩვენა SARS-CoV-214-სპეციფიკური T-უჯრედების პასუხების ცუდი იდენტიფიკაცია, თუმცა IL-2-ს სპეციფიკური პასუხები შეიძლება მიუთითებდეს წინასწარ არსებულ ჯვარედინი რეაქტიულობაზე.უჯრედები, რომლებიც დაკავშირებულია SARS-CoV-211 ინფექციის წინააღმდეგ თავდაცვასთან.
ერთად აღებული, ეს მონაცემები ხაზს უსვამს ფუნდამენტურ აუცილებლობას გრძელვადიანი გრძივი კვლევებისთვის, რომლებიც აერთიანებს SARS-CoV-2-ს სპეციფიკურ T უჯრედების პასუხებს პოპულაციის მასშტაბის იმუნიტეტის ზომებში.ამ ძალისხმევას შეიძლება დაეხმაროს ახალი კაპილარული სისხლის ტესტის შემუშავება, რომელიც ზომავს T- უჯრედების პასუხს.
კვლევით პროექტმა დაიკავა მონაწილეები 2021 წლის თებერვლიდან 2022 წლის მარტამდე. ჯანსაღი დონორთა ჯგუფი (n = 148), რომლებმაც გასცეს ვენური სისხლის ნიმუშები, ძირითადად შედგებოდა უნივერსიტეტის პერსონალისაგან და სტუდენტებისგან, რომლებიც მონაწილეობდნენ კარდიფის უნივერსიტეტის COVID-19 სკრინინგის სერვისში ან დაწყებითი სკოლის პერსონალისაგან. კარდიფი.ყველა მონაწილე სხვაგვარად ჯანმრთელი იყო და არ მოახსენეს რაიმე იმუნოსუპრესიული წამლის მიღებას (მახასიათებლისთვის იხილეთ ცხრილი 1).მონაწილეთა კოჰორტა, რომლებმაც გასცეს კაპილარული სისხლის ნიმუშები, მოიცავდა ყველა ნებაყოფლობით დონორს (18+ ასაკის) დიდი ბრიტანეთიდან.2022 წლის 24 იანვრიდან 14 მარტამდე პერიოდში კვლევაში ჩაირიცხა 342 მონაწილე, რომელთაგან 299-მა ლაბორატორიაში სისხლის ნიმუშები წარადგინა.ბევრი მონაწილე დარჩა არავაქცინირებული და/ან მოხსენებული სერიოზული თანმხლები დაავადებები, მათ შორის აუტოიმუნური დაავადებები და კიბო (იხ. ცხრილი 1 მახასიათებლებისთვის).ამ კვლევამ მიიღო ეთიკური დამტკიცება ნიუკასლისა და ჩრდილოეთ ტაინსაიდის 2 კვლევის ეთიკის კომიტეტისგან (ID IRAS: 294246) და კარდიფის უნივერსიტეტის მედიცინის კვლევის ეთიკის კომიტეტისგან (SREC ref: SMREC 21/01).ყველა მონაწილემ გასცა წერილობითი ინფორმირებული თანხმობა ჩართვამდე.მონაწილეებმა არ მიიღეს რაიმე კომპენსაცია ამ კვლევაში მონაწილეობისთვის.
ვენური სისხლის ნიმუშები მიღებული იყო ვენის პუნქციით 6 ან 10 მლ ლითიუმის ან ნატრიუმის ჰეპარინის ვაკუტაინერებში (BD).კაპილარული სისხლის ნიმუშები აღებული იქნა თითის ლანცეტით და შემდეგ შეგროვდა ჰეპარინის მიკროკონტეინერებში (BD).საჭიროა მინიმუმ 400 μl სისხლი;ამ თანხაზე ნაკლები ნებისმიერი ნიმუში უარყოფილი იქნება.ნიმუშის უარყოფის სხვა მიზეზები მოიცავდა მასიურ კოაგულაციას და/ან ჰემოლიზს და ბლანტი პლაზმის შეგროვების უკმარისობას ანალიზისთვის (დამატებითი სურ. 5).სულ 299 კაპილარული სისხლის ნიმუში იყო ხელმისაწვდომი ანტისხეულების პასუხების შესაფასებლად, აქედან 270 ნიმუში ასევე ხელმისაწვდომი იყო T უჯრედების პასუხების შესაფასებლად.
SARS-CoV-2-ის სპეციფიკური T უჯრედების პასუხები შეფასდა COVID-19 იმუნო-T ანალიზის გამოყენებით (ImmunoServ Ltd) და შესრულდა, როგორც ადრე იყო აღწერილი14.მოკლედ, ერთი 6 მლ ან 10 მლ ნატრიუმის ჰეპარინის (BD) ვენური ვაკუტაინერი აღებული იქნა თითოეული მონაწილისგან და დამუშავდა ლაბორატორიაში სისხლის შეგროვებიდან 12 საათის განმავლობაში.მიუხედავად იმისა, რომ ნიმუშების უმეტესობა დამუშავდა 24 საათის განმავლობაში, ერთი 400-600 მკლ ჰეპარინირებული მიკროსისხლდენის (BD) კაპილარული სისხლი შეგროვდა თითის თითის ნიმუშის აღებიდან 48 საათის განმავლობაში.ვენური და/ან კაპილარული სისხლის ნიმუშები სტიმულირებული იყო ცალკეული პეპტიდური აუზებით SARS-CoV-2-ისთვის (ველური ტიპის ვარიანტი), როგორც ადრე იყო აღწერილი14.ეს პეპტიდური ბიბლიოთეკა შეიცავს 420 15-მერის თანმიმდევრობას 11 გადახურვის ამინომჟავებით, რომლებიც მოიცავს მთელ ცილას (S1 და S2) (S; NCBI ცილა: QHD43416 1), ნუკლეოკაფსიდურ ფოსფოპროტეინს (NP; NCBI ცილა: QHD43423 მემბრანა პროტეინი (2M) NCBI ცილა: QHD43419 1) კოდირების თანმიმდევრობები (მოხსენიებული, როგორც "S-/NP-/M-კომბინატორიული პეპტიდების ბიბლიოთეკა").ყველა პეპტიდი გაწმენდილი იყო >70%-მდე, იხსნება სტერილურ წყალში და გამოიყენებოდა საბოლოო კონცენტრაციით 0,5 მკგ/მლ პეპტიდზე.ნიმუშები ინკუბირებული იყო 37°C ტემპერატურაზე 20-24 საათის განმავლობაში.შემდეგ მილები ცენტრიფუგირებულ იქნა 5000×გრ-ზე 3 წუთის განმავლობაში და ~150 μl პლაზმა შეგროვდა თითოეული სისხლის ნიმუშის ზემოდან.ციტოკინის/ანტისხეულების გამოვლენის ანალიზის დაწყებამდე შეინახეთ პლაზმის ნიმუშები -20°C ტემპერატურაზე ერთი თვის განმავლობაში.
IFN-γ გაზომილი იყო IFN-γ ELISA MAX Deluxe Set-ის გამოყენებით (BioLegend, კატალოგის ნომერი 430116) და შესრულდა მწარმოებლის ინსტრუქციის მიხედვით.შეჩერების ხსნარის (2N H2SO4) დამატების შემდეგ დაუყოვნებლივ, მიკროფირფიტა წაიკითხეს 450 ნმ-ზე BioLegend Mini ELISA ფირფიტის წამკითხველის გამოყენებით.IFN-γ რაოდენობრივად შეფასდა სტანდარტული მრუდის ექსტრაპოლაციით GraphPad Prism-ის გამოყენებით.ანალიზის გამოვლენის ქვედა ზღვარს ქვემოთ მნიშვნელობები დაფიქსირდა, როგორც 7.8 pg/ml, მნიშვნელობები ანალიზის ზედა გამოვლენის ლიმიტის ზემოთ დაფიქსირდა, როგორც 1000 pg/ml.
Anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG ანტისხეულები გაზომილი იყო Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-პლექს პანელის გამოყენებით (Bio-Rad, კატ. No. 12014634) და ეტიკეტირებული იყო შესაბამისად მწარმოებლის ინსტრუქციები.ინსტრუქციები.ნიმუშების საანგარიშო მნიშვნელობები რაოდენობრივ ზღვარს ზემოთ იყო გაანალიზებული 1:1000 განზავებით.მარცვლების საშუალო ფლუორესცენციის ინტენსივობა გაზომილი იყო Bio-Plex 200 ინსტრუმენტზე (Bio-Rad).ანტისხეულების კონცენტრაციები გამოითვალა VIROTROL SARS-CoV-2 ერთჯერადი საკონტროლო ანალიზით (Bio-Rad) და გადაკეთდა WHO/NIBSC 20/136 საერთაშორისო საცნობარო სტანდარტულ ერთეულებად (BAU/mL) მწარმოებლის კალიბრაციის ფაქტორის გამოყენებით.
RBD და S1 ქვედანაყოფის სპეციფიური განეიტრალებელი ანტისხეულები SARS-CoV-2 ველური ტიპისა და დელტას (B.1.617) SARS-CoV-2 ხაზების მიმართ გაზომილი იყო Bio-Plex Pro ადამიანის SARS-CoV-2 ვარიანტის ნეიტრალიზაციის ანტისხეულების ნაკრების გამოყენებით (Bio -რად , ნაწილი No 12016897), მწარმოებლის ინსტრუქციის მიხედვით.გაზომეთ ფლუორესცენციის საშუალო ინტენსივობა Bio-Plex 200-ზე (Bio-Rad) და გამოთვალეთ პროცენტული ინჰიბირება (ანუ ნეიტრალიზაცია) შემდეგი ფორმულის გამოყენებით:
SARS-CoV-2-ის ინფექციური ნეიტრალიზაციის ანალიზი ჩატარდა, როგორც ადრე იყო აღწერილი28.მოკლედ, ველური ტიპის SARS-CoV-2-ის 600 PFU ინკუბირებული იყო პლაზმის 3-ჯერადი სერიული განზავებით დუბლიკატში 1 საათის განმავლობაში 37°C-ზე.ნარევი შემდეგ დაემატა VeroE6 უჯრედებს 48 საათის განმავლობაში.მონოფენები დაფიქსირდა 4% პარაფორმალდეჰიდით, გაჟღენთილი იყო 0.5% NP-40 და ინკუბირებული იყო 1 საათის განმავლობაში ბლოკირებულ ბუფერში (PBS შეიცავდა 0.1% თვენს და 3% უცხიმო რძეს).პირველადი ანტისხეული (ანტი-ნუკლეოკაფსიდი 1C7, Stratech) დაემატა ბლოკირებულ ბუფერს 1 საათის განმავლობაში ოთახის ტემპერატურაზე.გარეცხვის შემდეგ მეორადი ანტისხეული (თაგვის საწინააღმდეგო IgG-HRP, Pierce) დაემატა ბლოკირებულ ბუფერს 1 საათის განმავლობაში.მონოფენები გარეცხილი, განვითარებული იქნა Sigmafast OPD-ის გამოყენებით და წაიკითხეს Clariostar Omega ფირფიტაზე.ჭაბურღილები ვირუსის გარეშე, ვირუსის გარეშე, მაგრამ ანტისხეულების გარეშე და ნორმალიზებული შრატები, რომლებიც აჩვენებენ შუალედურ აქტივობას, ჩართული იყო თითოეულ ექსპერიმენტში, როგორც კონტროლი.
სტატისტიკური ანალიზი ჩატარდა GraphPad Prism-ში (ვერსია 9.4.1).მონაცემთა ნაკრების ნორმალურობა შემოწმდა Shapiro-Wilk ტესტის გამოყენებით.ყველა შედარებისთვის გამოყენებული იყო არაპარამეტრული კრიტერიუმები.მენ-უიტნის ტესტი გამოიყენებოდა დაუწყვილებელი ნიმუშებისთვის.ყველა ტესტი იყო ორმხრივი ნომინალური მნიშვნელობის ზღურბლით P ≤ 0.05.
მონაცემთა ნაკრების თავდაპირველი საძიებო ანალიზი გაკეთდა R-ში (ვერსია 4.0.3).ეს მოიცავს Spearman-ის უნივარიატიული რანგის კორელაციის მატრიცის შემუშავებას, სადაც კორელაცია ორ ცვლადს შორის წარმოდგენილია კვადრატების ზომითა და ფერით.ასოციაციებს შორის სტატისტიკური მნიშვნელობა გამოითვალა Spearman's rho-ს გამოყენებით, სადაც მნიშვნელობები ≤0.05 ჩაითვალა მნიშვნელოვანი.შედარება, რომელიც არ იყო სტატისტიკურად მნიშვნელოვანი, გამოირიცხა მატრიციდან და მონიშნული იყო ცარიელი უჯრედებით.P-მნიშვნელობები დარეგულირდა მრავალჯერადი შედარებისთვის ჰოლმის კორექტირების გამოყენებით.ორობითი ლოგისტიკური რეგრესიის მოდელი გამოყენებული იქნა მონაცემთა ნაკრების ცვლადების ეფექტის სიმულაციისთვის COVID-19-ზე დადებით პასუხზე.IFN-γ T უჯრედების პასუხები და ანტი-RBD/S1/S2/N IgG ტიტრის ქულები გადაკეთდა ფაქტორებად, სადაც თითოეულ ინდივიდს მიენიჭა შესაბამისი მეოთხედი თითოეული ქულისთვის.ამის შემდეგ შემუშავდა საწყისი კვლევის მოდელი სტატისტიკურ პაკეტში glm ფუნქციის გამოყენებით (V4.0.3).ამ ორიგინალური მოდელიდან მიღებული შანსების კოეფიციენტები ამოღებულია მოდელის კოეფიციენტებიდან OddsPlotty პაკეტში (V1.0.2) ფუნქციის 'odds_plot' ფუნქციის გამოყენებით.ჯვარედინი ვალიდაციის მოდელის შემუშავებისას, ჩვენ გამოვიყენეთ „bestglm“ ფუნქცია bestglm პაკეტიდან (V0.37.3), რათა შეგვეზღუდა მომხმარებლის მიკერძოება და უზრუნველვყოთ პროგნოზირების საუკეთესო ქვეჯგუფის არჩევა.არჩეული მეთოდი იყო „ამომწურავი“ და ინფორმაციის კრიტერიუმი, რომელიც გამოიყენებოდა მოდელის შესაფასებლად იყო AIC.იგივე სამუშაო პროცესი, რომელიც ზემოთ იყო აღწერილი, გამოყენებული იქნა შანსების კოეფიციენტის მისაღებად.
კვლევის დიზაინის შესახებ დამატებითი ინფორმაციისთვის იხილეთ ბუნების კვლევის აბსტრაქტი, რომელიც დაკავშირებულია ამ სტატიასთან.
წერილები და მასალების მოთხოვნა უნდა მიმართოთ დოქტორ მარტინ სკარს ან პროფესორ ენდრიუ გოდკინს.ამ სტატიაში მოცემულია ორიგინალური მონაცემები.
სტატისტიკური მოდელების შესაქმნელად გამოყენებული R კოდი საჯაროდ ხელმისაწვდომია მოთხოვნის გარეშე29.ხელახლა დაბეჭდვის შესახებ ინფორმაცია და ლიცენზიები შეგიძლიათ იხილოთ ვებგვერდზე www.nature.com/reprints.
Munro, APS და სხვ.შვიდი COVID-19 ვაქცინის უსაფრთხოება და იმუნოგენურობა, როგორც მესამე დოზა (გამაძლიერებელი) ChAdOx1 nCov-19 ან BNT162b2 (COV-BOOST) ორი დოზის შემდეგ დიდ ბრიტანეთში: ფაზა 2, დაბრმავებული, მულტიცენტრული, რანდომიზებული, კონტროლირებადი კვლევა.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
სტიუარტი, ASV და სხვ.ჰეტეროლოგიური პირველადი ვაქცინაციის იმუნოგენურობა, უსაფრთხოება და რეაქტოგენურობა COVID-19-ის (Com-COV2) წინააღმდეგ mRNA, ვირუსული ვექტორების და ცილის დამხმარე ვაქცინების გამოყენებით გაერთიანებულ სამეფოში: ფაზა 2, ერთბრმა, რანდომიზებული საცდელი, არასრულფასოვნების ტესტი.Lancet 399, 36–49 (2022).
ლი, ARIB და სხვ.COVID-19 ვაქცინების ეფექტურობა იმუნოკომპრომეტირებულ პაციენტებში: სისტემატური მიმოხილვა და მეტა-ანალიზი.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.SARS-CoV-2 მიკრონი ვარიანტის B.1.1.529-ის ნეიტრალიზაცია დაქვეითებული შრატით იმუნიზაციის შემდეგ.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y და Baliser RD გარღვევის ინფექცია SARS-CoV-2 ვაქცინირებულ პირებში: გაზომვა, მიზეზები და შედეგები.იმუნოლოგიის ეროვნული მღვდელი.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
ლევინი, EG და სხვ.დასუსტებული იმუნური ჰუმორული პასუხი BNT162b2 Covid-19 ვაქცინაზე 6 თვის განმავლობაში.ნ ინგ.ჯ.მედიცინა.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.გამოჯანმრთელების და ვაქცინის შრატების აქტივობა SARS-CoV-2 Omicron-ის წინააღმდეგ.Nature 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.ყატარის mRNA ვაქცინის დაცვის ხანგრძლივობა SARS-CoV-2 Omicron BA.1 და BA.2 ქვევარიანტებისგან.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
ტაი, MZ და სხვ.მეხსიერების B უჯრედების სიხშირე მცირდება COVID-19 დელტა ვაქცინის გარღვევის შედეგად.მოლეკულური მედიცინის EMBO.14, e15227 (2022).
კუნდუ, რ. და სხვ.ჯვარედინი რეაქტიული მეხსიერების T უჯრედები დაკავშირებულია COVID-19 კონტაქტების დაცვასთან SARS-CoV-2 ინფექციისგან.ეროვნული კომუნა.13, 80 (2022).
გეურცვან კესელი, ჩ.ჰ. და სხვ.გამორჩეული SARS CoV-2 ომიკრონ-რეაქტიული T უჯრედები და B უჯრედები COVID-19 ვაქცინის მიმღებებში.მეცნიერება.იმუნოლოგია.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
გაო, იუ და სხვ.მემკვიდრეობით მიღებული SARS-CoV-2-სპეციფიკური T უჯრედები ჯვარედინად ცნობენ Omicron-ის ვარიანტებს.ეროვნული მედიცინა.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ და სხვ.SARS-CoV-2-სპეციფიკური T უჯრედების გაზომვა მთლიანი სისხლიდან ავლენს უსიმპტომო ინფექციას და ვაქცინის იმუნოგენურობას ჯანმრთელ ადამიანებში და პაციენტებში მყარი ორგანოს კიბოს იმუნოლოგია https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT et al.SARS-CoV-2 სპაიკ T უჯრედების სწრაფი გაზომვა ვაქცინირებული და ბუნებრივად ინფიცირებული პირების მთელ სისხლში.J. კლინიკური.ინვესტირება.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU et al.COVID-19 ვაქცინის პასუხი გაფანტული სკლეროზის მქონე პაციენტებში.დაინსტალირება.ნეირონები.91, 89–100 (2022).
ბრედლი RE და სხვ.მუდმივი COVID-19 ინფექცია ვისკოტ-ოლდრიხის სინდრომით გაქრა თერაპიული ვაქცინაციის შემდეგ: შემთხვევის მოხსენება.J. კლინიკური.იმუნოლოგია.42, 32–35 (2022).